基因工程抗体是指利用基因工程技术将抗体基因重组和克隆到表达载体中,并在合适的宿主中表达和折叠成功能性抗体分子。基因工程抗体具有分子小、免疫原性低、可塑性强、成本低等优点。该技术的基本原理是从杂交细胞、免疫脾细胞和外周血淋巴细胞中提取mRNA,反转录成cDNA,然后将扩增的重链和轻链基因抗体分别进行PCR,以某种方式保留原始文本抗体的亲和力和特异性。基因工程抗体主要通过修饰这些区域获得。
1、生物传感器:生物传感器主要用于测定抗原和抗体的亲和力。它利用抗体与抗原相互作用引起的细胞质表面共振来改变偏振光的反射。与传统方法相比,它可以描述曲线并提供显示动态变化的信息。
2、噬菌体库技术的进展:过去,大多数材料都是抗病毒抗体。由于病毒具有较强的抗原特异性,很容易筛选出相应的抗体。此外,该方法也得到了改进。例如,已经开发出一种选择性感染噬菌体的方法,可以同时分离和克隆小肽抗原和相应抗体。另一个例子是,片段基因可以通过噬菌体技术获得,然后重组技术可以产生新的双功能或双特异性抗体、抗体和免疫粘附的混合分子。
3、表达和生产:为了扩大表达和生产规模,节约成本,转基因家畜可用于生产人类蛋白质。例如,利用转基因绵羊生产A1抗胰蛋白酶、纤维蛋白原和转基因乳腺分泌抗体;利用转基因小鼠产生高亲和力和高特异性的人整体抗体。
4、细胞内抗体定位:为了进一步了解抗体基因和抗体蛋白在细胞内的表达和功能,以及代谢和功能之间的关系,可使用抗j链和K链抗体定位抗体的可变区和单链抗体;使用标记肽或部分肽的抗体,可以定位标记的全局抗体或可变区域抗体。总之,免疫细胞化学和免疫电镜可以用来研究细胞内免疫的形态学。
5、无抗原技术:美国基因科学引入的无抗原技术具有一定的吸引力。它被认为是一种生产高亲和力、高特异性单克隆抗体的新技术。在缺乏佐剂的情况下,小抗原可以产生针对小肽的抗体,而无需先交联成大蛋白。主要方法是在无菌环境中使小鼠出生时保持无菌,所用饲料成分的分子量保持在10000道尔顿以下。包括氨基酸、单糖、脂类、维生素和矿物质。
6、细胞内抗体技术:非淋巴细胞表达生物活性抗体,并通过适当修饰抗体分子,将其定向分布在细胞核、细胞质或某些细胞器中,从而特异性干扰或阻断该部位的分布。某些生物成分的活动、加工和分泌引起细胞一系列生物过程的变化。它是继反义RNA、特异性核酶、显性负突变和“自杀”基因等技术之后的一种新的基因治疗方法。它是抗体工程技术和基因治疗的结合。
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